Мк ларисы тепляковой: МК «ПИОН» от Ларисы Тепляковой

Необыклновенно красивые платья от STELLA DE LIBERO: laura_mz — LiveJournal

Необыклновенно красивые платья от STELLA DE LIBERO: laura_mz — LiveJournal ?

мой волшебный мир кулинарии и творчества (laura_mz) wrote,

мой волшебный мир кулинарии и творчества
laura_mz

Category:
  • Мода
  • Cancel
Автор — Гелла_Чара. Это цитата этого сообщения
Красивые фотографии! Платья от STELLA DE LIBERO

Не свежачок конечно, но любоваться можно долго =)

Серия сообщений «cвадебное»:
Часть 1 — Свадебные перчатки.

Часть 2 — Свадебная бижутерия

Часть 46 — Букеты, МК от Ларисы Тепляковой
Часть 47 — Фата (несколько видов), video
Часть 48 — Необыклновенно красивые платья от STELLA DE LIBERO

Tags: fashion

Subscribe

  • Я вернулась с моей новой бижутерией, ура!

    Я вернулась с моей новой бижутерией, ура! Случился у меня такой большой перерыв, не могла никак добраться до компьютера несколько месяцев… Но без…

  • Пельмени с фаршем из индейки

    Иногда балую себя любимую пельмешками. Обычно беру фарш индейки смеси тёмного и белого мяса, лук, зелень. Тесто из делаю из смеси 3х разновидностей…

  • Сироп из молодых побегов ели

    Нашла информацию о том, что можно использовать в пищу молодые побеги хвойных деревьев. Их добавляют в салаты, можно сделать прохладительный напиток…

  • Сама садик я садила..
    .

    В настоящее время так сложились обстоятельства — всем нам нелегко! Находиться дома в закрытом пространстве и не зная чем себя занять, трудно.…

  • Как самим сделать замечательную смесь специй Za’atar

    Ингредиенты 2 стол.л. кунжут (sesame seeds, toasted) 1 стол.л. сушёный тимьян (dried thyme) 1 стол.л. сушёный орегано (dried oregano)…

  • Разгрузочные соки вместо еды

    Для меня сейчас наступило хорошее время чтобы больше экспериментировать с едой. Хочется усилить здоровый образ жизни. Я решила заменять хотя бы…

Photo

Hint http://pics.livejournal.com/igrick/pic/000r1edq

  • 2 comments
    • 2 comments

    Ассоциация свит-дизайнеров и фудфлористов

    Графики роста подписчиков

    Лучшие посты

    Перейти к посту

    Сколько раз меня просили показать как я креплю чупа-чупсы в своем коронном букете из 100 чупиков и не сосчитать. Это был самый популярный вопрос🤪
    Все совпало и вот несколько фото процесса.
    #МК_@konfetbyket #мкбукетизчупачупсов #букетизчупачупсов

    254 202 3 ER 0.6913

    Перейти к посту

    Золотая рыбка из двух конфет!
    Может быть самостоятельным подарком или декором к шоколадке
    от [id35077976|Наталья Синицына]

    254 118 0 ER 0. 5578

    Перейти к посту

    Как создать оригинальное украшение к Новому году? Смотрите короткий МК и сохраняйте к себе на стену.

    242 115 1 ER 0.5403

    Перейти к посту

    Один, но очень большой и сладкий! А почему бы и да!
    Большие цветы с конфетами от мастеров нашей [club45552967|Ассоциация свит-дизайнеров и фудфлористов]

    146 38 0 ER 0.

    2771

    Перейти к посту

    Сливочная красота, нежнее нежного)
    [club45552967|Ассоциация свит-дизайнеров и фудфлористов]

    143 14 0 ER 0.2363

    Перейти к посту

    Летняя нежность от мастеров [club45552967|Ассоциация свит-дизайнеров и фудфлористов]

    134 19 1 ER 0. 2319

    Перейти к посту

    Скоро мы все будем готовиться к 1 сентября! И в этот праздник букет из хризантем почти каждый второй. МК от Натальи Синицыной как нельзя кстати )

    134 94 0 ER 0.3435

    Перейти к посту

    Доброго утра и чудесного дня!
    Суббота, а значит, мы начинаем наш день с работ, которые вы присылаете нам в паблик [club118055532|Букеты из конфет — идеи и практика]
    Сегодня это шикарные композиции [id206384137|Ларисы Тепляковой]

    Присылайте и вы свои работы в паблик [club118055532|Букеты из конфет — идеи и практика], а лучшие из них украсят стену нашей Ассоциации.

    126 7 6 ER 0.2096

    Перейти к посту

    Бодрого утра и отличного дня!
    Суббота, а значит время публикации работ, которые вы присылаете нам в паблик [club118055532|Букеты из конфет — идеи и практика]
    И сегодня нашу стену украсят изумительные композиции [id206384137|Ларисы Тепляковой]

    Присылайте свои работы в паблик [club118055532|Букеты из конфет — идеи и практика], ведь они вдохновляют наших подписчиков, а мы их обязательно опубликуем на стене нашей Ассоциации свит-дизайнеров и фудфлористов.

    122 21 1 ER 0.2169

    Перейти к посту

    Кто бы не хотел получить в подарок такой букет? Стильно, ярко, вкусно и, как всегда, красиво!!!

    122 14 0 ER 0. 2047

    Как изменилась опасность для человека микроорганизмов, обнаруженных в атмосферном аэрозоле на юге Западной Сибири, за 10 лет?

    1. Artaxo P., Storms H., Bruynseels F., Van Grieken R., Maenhaut W. Состав и источники аэрозолей из бассейна Амазонки. Дж. Геофиз. Рез. 1988; 93: 1605–1615. doi: 10.1029/JD093iD02p01605. [CrossRef] [Google Scholar]

    2. Artaxo P., Maenhaut W., Storms H., Van Grieken R. Характеристики и источники аэрозолей в бассейне Амазонки в сезон дождей. Геофиз. Рез. 1990;95:16971–16985. doi: 10.1029/JD095iD10p16971. [CrossRef] [Google Scholar]

    3. Matthias-Maser S., Jaenicke R. Изучение частиц атмосферного биоаэрозоля с радиусом >0,2 мкм. J. Aerosol Sci. 1994; 25:1605–1613. doi: 10.1016/0021-8502(94)-3. [CrossRef] [Google Scholar]

    4. Zhang Q., Jimenez J.L., Canagaratna M. R., Allan J.D., Coe H., Ulbrich I., Alfarra M.R., Takami A., Middlebrook A.M., Sun Y.L., et al. Повсеместное распространение и преобладание оксигенированных видов в органических аэрозолях в средних широтах северного полушария, находящихся под антропогенным влиянием. Геофиз. Рез. лат. 2007; 34: L13801: 1–L13801: 6. дои: 10.1029/2007GL029979. [CrossRef] [Google Scholar]. и другие. Биоаэрозоли в системе Земли: взаимодействие климата, здоровья и экосистемы. Атмос. Рез. 2016; 182:346–376. doi: 10.1016/j.atmosres.2016.07.018. [CrossRef] [Google Scholar]

    6. Моррис К.Э., Сэндс Д.К., Бардин М., Янике Р., Фогель Б., Лейронас К., Ария П.А., Псеннер Р. Микробиология и атмосферные процессы: проблемы исследования, касающиеся воздействия Воздействие микроорганизмов, находящихся в воздухе, на атмосферу и климат. Биогеонауки. 2011; 8:17–25. дои: 10.5194/bg-8-17-2011. [CrossRef] [Google Scholar]

    7. Сахьюн М., Векс Х., Гозевинкель У., Сантл-Темкив Т., Нильсен Н.В., Финстер К., Соренсен Дж. Х., Стратманн Ф., Корсхольм У.С. Теория нуклеации в количественной оценке воздействия бактериального INP на погоду и климат. Атмос. Окружающая среда. 2016; 139: 230–240. doi: 10.1016/j.atmosenv.2016.05.034. [CrossRef] [Google Scholar]

    8. Douwes J., Thorne P., Pearce N., Heederik D. Влияние биоаэрозолей на здоровье и оценка воздействия: прогресс и перспективы. Анна. Занять. Гиг. 2003; 47: 187–200. дои: 10.1093/annhyg/meg032. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    9. Ким К.-Х., Кабир Э., Джахан С.А. Биоаэрозоли в воздухе и их влияние на здоровье человека. Дж. Окружающая среда. науч. 2018;67:23–35. doi: 10.1016/j.jes.2017.08.027. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    10. Вальсер С.М., Герстнер Д.Г., Бреннер Б., Бюнгер Дж., Эйкманн Т., Янссен Б., Колб С., Колк А., Новак Д., Раульф М. и соавт. Оценка взаимосвязей между воздействием и реакцией на воздействие микробных биоаэрозолей на здоровье — систематический обзор. Междунар. Дж. Хиг. Окружающая среда. Здоровье. 2015;218:577–589. doi: 10.1016/j.ijheh.2015.07.004. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    11. Fernstrom A., Goldblatt M. Аэробиология и ее роль в передаче инфекционных заболеваний. Дж. Патогены. 2013; 2013:493960:1–493960:14. doi: 10.1155/2013/493960. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    12. Ypma RJF, Jonges M., Bataille A., Stegeman A., Koch G., van Boven M., Koopmans M., van Ballegooijen W.M. , Валлинга Дж. Генетические данные свидетельствуют о передаче высокопатогенного птичьего гриппа ветром. Дж. Заразить. Дис. 2013; 207:730–735. дои: 10.1093/infdis/jis757. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    13. An HR, Mainelis G., White L. Разработка и калибровка ПЦР в реальном времени для количественного определения переносимых по воздуху микроорганизмов в пробах воздуха. Атмос. Окружающая среда. 2006; 40:7924–7939. doi: 10.1016/j.atmosenv.2006.07.020. [CrossRef] [Google Scholar]

    14. Белградер П., Элькин С.Дж., Браун С.Б., Насарабади С. Н., Ланглуа Р.Г., Миланович Ф.П., Колстон Б.В. мл., Маршалл Г.Д. мониторинг инфекционных биологических агентов. Анальный. хим. 2003; 75:3446–3450. doi: 10.1021/ac034062u. [PubMed] [CrossRef] [Академия Google]

    15. Цзян В., Лян П., Ван Б., Фанг Дж., Ланг Дж., Тянь Г., Цзян Дж., Чжу Т.Ф. Оптимизированная экстракция ДНК и метагеномное секвенирование микробных сообществ, находящихся в воздухе. Протоколы о природе. 2015;10:768–779. doi: 10.1038/nprot.2015.046. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    16. Maron P.A., Lejon D.P.H., Carvalho E., Bizet K., Lemanceau P., Ranjard L., Mougel C. Оценка генетической структуры и разнообразия переносимые по воздуху бактериальные сообщества с помощью фингерпринтинга ДНК и библиотек клонов 16S рДНК. Атмос. Окружающая среда. 2005;39: 3687–3695. doi: 10.1016/j.atmosenv.2005.03.002. [CrossRef] [Google Scholar]

    17. Mbareche H., Brisebois E., Veillette M., Duchaine C. Методы отбора проб и обнаружения биоаэрозолей на основе молекулярных подходов: нет боли — нет выгоды. науч. Общая окружающая среда. 2017; 599–600:2095–2104. doi: 10.1016/j.scitotenv.2017.05.076. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    18. Rinsoz T., Duquenne P., Greff-Mirguet G., Oppliger A. Применение ПЦР в реальном времени для оценки общего количества переносимых по воздуху бактерий: сравнение с эпифлуоресцентной микроскопией и посевом. зависимые методы. Атмос. Окружающая среда. 2008;42:6767–6774. doi: 10.1016/j.atmosenv.2008.05.018. [Перекрестная ссылка] [Академия Google]

    19. Сюй С., Яо М. НаноПЦР-обнаружение бактериальных аэрозолей. J. Aerosol Sci. 2013;65:1–9. doi: 10.1016/j.jaerosci.2013.06.005. [CrossRef] [Google Scholar]

    20. Zhang K., Martiny A.C., Reppas N.B., Barry K.W., Malek J., Chisholm S.W., Church G.M. Секвенирование геномов из одиночных клеток методом полимеразного клонирования. Природные биотехнологии. 2006; 24: 680–686. doi: 10.1038/nbt1214. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    21. Депрес В.Р., Новойски Дж.Ф., Клозе М., Конрад Р., Андреэ М. О., Пёшль Ю. Характеристика первичных биогенных аэрозольных частиц в воздухе городов, сельской местности и высокогорных районов. с помощью анализа последовательности ДНК и фрагментов рестрикции генов рибосомной РНК. Биогеонауки. 2007; 4:1127–1141. дои: 10.5194/бг-4-1127-2007. [CrossRef] [Google Scholar]

    22. Caporaso J.G., Lauber C.L., Walters W.A., Berg-Lyons D., Huntley J., Fierer N., Owens S.M., Betley J., Fraser L., Bauer M., et al. др. Анализ микробного сообщества со сверхвысокой производительностью на платформах Illumina HiSeq и MiSeq. ISME J. 2012; 6: 1621–1624. doi: 10.1038/ismej.2012.8. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    23. Ча С., Шринивасан С., Джанг Дж. Х., Ли Д., Лим С., Ким К. С., Чжон В., Ли Д.-В. ., Park E.-R., Chung H.-M., et al. Метагеномный анализ переносимого по воздуху бактериального сообщества и разнообразия в Сеуле, Корея, в декабре 2014 г., Азиатское пылевое событие. ПЛОС ОДИН. 2017;12:e0170693:1–e0170693:12. doi: 10.1371/journal. pone.0170693. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    24. Дюкен П. Об идентификации культивируемых микроорганизмов для оценки биоразнообразия в биоаэрозолях. Анна. Работа Экспо. Здоровье. 2018;62:139–146. doi: 10.1093/annweh/wxx096. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    25. Гао Ж.-Ф., Фань X.-Y., Ли Х.-Ю., Пан К.-Л. Бактериальные сообщества PM 2,5 в мегаполисе Пекин-Тяньцзинь-Хэбэй, Китай, обнаруженные с помощью секвенирования Illumina MiSeq: тематическое исследование. Аэрозоль Эйр Квал. Рез. 2017; 17: 788–798. doi: 10.4209/aaqr.2016.02.0087. [CrossRef] [Google Scholar]

    26. Серрано-Сильва Н., Кальдерон-Эскерро М.К. Метагеномное исследование бактериального разнообразия в атмосфере Мехико с использованием различных методов отбора проб. Окружающая среда. Загрязн. 2018; 235:20–29. doi: 10.1016/j.envpol.2017.12.035. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    27. Yoo K., Lee T.K., Choi E.J., Yang J., Shukla S.K., Hwang S.-I., Park J. Молекулярные подходы к обнаружению и мониторингу микробных сообщества в биоаэрозолях: обзор. Дж. Окружающая среда. науч. 2017; 51: 234–247. doi: 10.1016/j.jes.2016.07.002. [PubMed] [CrossRef] [Академия Google]

    28. Сафатов А.С., Андреева И.С., Белан Б.Д., Буряк Г.А., Емельянова Е.К., Янике Р., Панченко М.В., Печуркина Н.И., Пучкова Л.И., Репин В.Е., и др. Насколько жизнеспособные бактерии в атмосферных аэрозолях могут быть опасны для человека? Чистый. 2008; 36: 564–571. doi: 10.1002/clen.200700194. [CrossRef] [Google Scholar]. элементом и биогеохимической нишей. Экология. 2019;100:e02652:1–e02652:15. doi: 10.1002/ecy.2652. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    Тунисские водохранилища: диагностика и биологические возможности. Аква. Живой ресурс. 2019;32:17:1–17:17. doi: 10.1051/alr/2019014. [CrossRef] [Google Scholar]

    31. Huang Y., Guenet B., Ciais P., Janssens I.A., Soong J.L., Wang Y., Goll D., Благодатская E., Huang Y. ORCHIMIC (v1.0) , опосредованная микробами модель разложения органического вещества почвы. Geosci. Модель Дев. 2018;11:2111–2138. дои: 10.5194/гмд-11-2111-2018. [CrossRef] [Google Scholar]

    32. Зуиди М., Борсали А.Х., Аллам А., Грос Р. Характеристика почв хвойных лесов в аридной зоне. Окружающая среда. науч. 2018;68:64–74. doi: 10.2478/fsmu-2018-0006. [CrossRef] [Google Scholar]

    33. Boyd P.W., Collins S., Dupont S., Fabricius K., Gattuso J.-P., Havenhand J., Hutchins D.A., Riebesell U., Rintoul M.S., Vichi M. , и другие. Экспериментальные стратегии для оценки биологических последствий многочисленных факторов глобального изменения океана — обзор. Глоб Изменение Биол. 2018;24:2239–2261. doi: 10.1111/gcb.14102. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    34. Блажейчик К., Барановский Ю., Блажейчик А. Заболевания, связанные с климатом. Текущая региональная изменчивость и прогнозы до 2100 года. Quaestiones Geographicae. 2018;37:23–36. doi: 10.2478/quageo-2018-0003. [CrossRef] [Google Scholar]

    35. Масягина О.В., Меняйло О.В. Влияние вечной мерзлоты на потоки углекислого газа и метана в Сибири: метаанализ. Окружающая среда. Рез. 2020;182:109096. doi: 10.1016/j.envres.2019.109096. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    36. Zhang-Turpeinen H., Kivimäenpää M., Aaltonen H., Berninger F., Köster E., Köster K., Menyailo O., Prokushkin A., Pumpanen J. • Влияние лесных пожаров на выбросы БЛОС из бореальной лесной подстилки на вечномерзлую почву в Сибири. науч. Общая окружающая среда. 2020;711:134851. doi: 10.1016/j.scitotenv.2019.134851. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    37. Ревич Б.А., Шапошников Д.А. Эпизоды экстремальных температур и смертность в Якутске, Восточная Сибирь. Сельское удаленное здоровье. 2010;10:1338. [PubMed] [Академия Google]

    38. Коновалов И.Б., Львова Д.А., Бекманн М., Джетва Х., Михайлов Э.Ф., Пэрис Ж.-Д., Белан Б.Д., Козлов В.С., Сиаис П., Андреэ М.О. Оценка выбросов черного углерода от сибирских пожаров с использованием спутниковых наблюдений за оптическими глубинами поглощения и поглощения. Атмос. хим. физ. 2018;18:14889–14924. doi: 10.5194/acp-18-14889-2018. [CrossRef] [Google Scholar]

    39. Антохина О.Ю., Антохин П.Н., Мартынова Ю.В. Выбросы метана от лесных пожаров в Сибири, вызванные атмосферным блокированием в летнее время; Материалы 25-го Международного симпозиума по оптике атмосферы и океана: физика атмосферы; Новосибирск, Россия. 1–5 июня 2019 г.. [Google Scholar]

    40. Короткова Е.М., Зуев В.В., Павлинский А.В. Трендовый и корреляционный анализ температуры воздуха и NDVI в Западной Сибири за период 1982-2015 гг.; Материалы 25-го Международного симпозиума по оптике атмосферы и океана: физика атмосферы; Новосибирск, Россия. 1–5 июня 2019 г. [Google Scholar]

    41. Бабушкина Е.А., Жирнова Д.Ф., Белокопытова Л.В., Тычков И.И., Ваганов Е.А., Крутовский К.В. Реакция четырех видов деревьев на изменение климата в условиях ограниченного увлажнения Южной Сибири. Леса. 2019;10:999. doi: 10.3390/f10110999. [CrossRef] [Google Scholar]

    42. Кенигк Т., Фуэнтес-Франко Р. К нормальным сибирским зимним температурам? Междунар. Дж. Климатол. 2019; 39: 4567–4574. doi: 10.1002/joc.6099. [CrossRef] [Google Scholar]

    43. Сун Л., Ву Р. Внутрисезонные колебания снежного покрова над Западной Сибирью и связанные с ними атмосферные процессы. Дж. Геофиз. Рез. Атмосфера. 2019;124:8994–9010. дои: 10.1029/2019JD030479. [CrossRef] [Google Scholar]

    44. Горбатенко В.П., Севастьянов В.В., Константинова Д.А., Носырева О.В. Серия конференций IOP: Науки о Земле и окружающей среде. Том 232. Издательство IOP; Бристоль, Великобритания: 2019 г.. Характеристика снежного покрова для территории Западной Сибири. [CrossRef] [Google Scholar]

    45. Поднебесных Н.В., Логинов С.В., Харюткина Е.В., Усова Е.И. Вихревая циркуляция и аномальные метеорологические явления над азиатской территорией России в контексте изменения климата; Материалы 25-го Международного симпозиума по оптике атмосферы и океана: физика атмосферы; Новосибирск, Россия. 1–5 июня 2019 г. [Google Scholar]

    46. Костелло А., Аббас М., Аллен А., Болл С. , Белл С., Беллами Р., Фрил С., Гроус Н., Джонсон А., Кетт М. и др. Борьба с последствиями изменения климата для здоровья: Lancet и Институт глобального здравоохранения Лондонского университетского колледжа. Ланцет. 2009 г.;373:1693–1733. doi: 10.1016/S0140-6736(09)60935-1. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    47. Ryti N.R.I., Guo Y., Jaakkola J.J.K. Глобальная ассоциация периодов простуды и неблагоприятных последствий для здоровья: систематический обзор и метаанализ. Перспектива охраны окружающей среды. 2016; 124:12–22. doi: 10.1289/ehp.1408104. [PMC free article] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    48. Зуев В.Е., Белан Б.Д., Кабанов Д.М., Ковалевский В.К., Лукьянов О.Ю., Мелешкин В.Е., Микушев М.К., Панченко М.В., Пеннер И.Е., Покровский Е.Д. , и другие. Самолет «ОПТИК-Э» АН-30-лаборатория экологических исследований. Атмос. Океаническая оптика. 1992;5:658–663. [Google Scholar]

    49. Белан Б.Д., Зуев В.Е., Панченко М.В. Основные результаты аэрозондирования аэрозоля, проведенного в Институте оптики атмосферы с 1981 по 1991 гг. Атмосфер. Океаническая оптика. 1995; 8: 131–156. [Google Scholar]

    50. Белан Б.Д., Лигоцкий А.В., Лукьянов О.Ю., Микушев М.К., Плохих И.Н., Поданев А.В., Толмачев Г.Н. База данных по результатам экологического обследования воздушных бассейнов. Атмос. Океаническая оптика. 1994; 7: 585–590. [Академия Google]

    51. Белан Б.Д. Авиационное экологическое зондирование атмосферы. Атмос. Океаническая оптика. 1993; 6: 205–222. [Google Scholar]

    52. Аппаратура для дистанционного зондирования параметров атмосферы. В.Е. Зуев Т.П. СО АН СССР, СССР; Томск, Россия: 1987. с. 156. [Google Scholar]

    53. Назаров Л.Е. Отбор проб изокинетических атмосферных аэрозолей с самолета. тр. Инст. Эксп. Метеор. 1985; 9: 76–81. (на русском языке) [Google Scholar]

    54. Griffiths W.D., DeCosemo G.A.L. Оценка биоаэрозолей: критический обзор. J. Aerosol Sci. 1994;25:1425–1458. doi: 10.1016/0021-8502(94)

    -6. [CrossRef] [Google Scholar]

    55. Миллер Дж.Х. Эксперименты по молекулярной генетике. Лабораторный пресс Колд-Спринг-Харбор; Нью-Йорк, штат Нью-Йорк, США: 1972. с. 468. [Google Scholar]

    56. Сэгги Дж. Методы почвенной микробиологии. Издательство «Колос», СССР; Москва, Россия: 1983. с. 295. [Google Scholar]

    57. Gerhardt F., Murray R.G.E., Wood W.A., Krieg N.R., editors. Методы общей бактериологии. 2-е изд. Издательство Американского общества микробиологии; Вашингтон, округ Колумбия, США: 1994. с. 791. [Google Scholar]

    58. Starr M.P., Stolp H., Truper H.G., Balows A., Schlegel H.G., editors. Прокариоты. Справочник по средам обитания, изоляции и идентификации бактерий. Спрингер; Берлин/Гейдельберг, Германия: 1981. с. 2596. [Google Scholar]

    59. Лебедева М.Н. Руководство для практических занятий по медицинской микробиологии. Медицина, СССР; Москва, Россия: 1973. с. 312. [Google Scholar]

    60. Маниатис Т., Фрич Э.Э., Сэмбрук Дж. Молекулярное клонирование. Руководство по лаборатории. Лаборатория Колд-Спринг-Харбор; Нью-Йорк, штат Нью-Йорк, США: 1982. с. 545. [Google Scholar]

    61. Weisburg W.G., Barns S.M., Pelletier D.A., Lane D.J. Амплификация 16S рибосомной ДНК для филогенетического исследования. Дж. Бактериол. 1991; 173: 697–703. doi: 10.1128/JB.173.2.697-703.1991. [Статья PMC free] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    62. Ашмарин И.П., Воробьев А.А., ред. Статистические методы в микробиологических исследованиях. Медгиз, СССР; Ленинград, Россия: 1962. с. 180. [Google Scholar]

    63. Репин В.Е., Лебедев Л.Р., Андреева И.С., Пучкова Л.И., Зернов Ю.П., Серов Г.Д., Терещенко Т.А., Афиногенова Г.Н., Пустошилова Н.М. основы технологий производства ферментов. Биотехнология. 1998;2:18–27. (In Russian) [Google Scholar]

    64. Анохин Г.Г., Антохин П.Н., Аршинов М.Ю., Барсук В.Е., Белан Б.Д., Белан С.Б., Давыдов Д.К., Ивлев Г.А., Козлов А.В., Козлов В.С., и др. Авиалаборатория ОПТИК Ту-134. Атмос. Океаническая оптика. 2011; 24:805–816. doi: 10.1175/2011JTECHA1427.1. [CrossRef] [Google Scholar]

    65. Сафатов А. С., Буряк Г.А., Андреева И.С., Олькин С.Е., Резникова И.К., Сергеев А.Н., Белан Б.Д., Панченко М.В. Атмосферные биоаэрозоли. В: Аграновский И., редактор. Аэрозоли – наука и техника. Wiley – VCH Verlag GmbH & Co. KGaA; Винхайм, Германия: 2010. стр. 407–454. [Академия Google]

    66. Армстронг Дж.Л., Шигено Д.С., Каломирис Дж.Дж., Сейглер Р.Дж. Устойчивые к антибиотикам бактерии в питьевой воде. заявл. Окружающая среда. микробиол. 1981; 42: 277–283. doi: 10.1128/AEM.42.2.277-283.1981. [PMC free article] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    67. Baquero F., Martinez J.-L., Cantón R. Антибиотики и устойчивость к антибиотикам в водной среде. Курс. мнение Биотехнолог. 2008; 19: 260–265. doi: 10.1016/j.copbio.2008.05.006. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    68. Boczek L.A., Rice E.W., Johnston B., Johnston J.R. Возникновение антибиотикорезистентных уропатогенов Escherichia coli клональной группы А в сточных водах. заявл. Окружающая среда. микробиол. 2007; 73: 4180–4184. doi: 10.1128/AEM.02225-06. [PMC free article] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    69. Эсиобу Н., Армента Л., Айк Дж. Устойчивость к антибиотикам в почве и водной среде. Междунар. Дж. Окружающая среда. Здоровье Рез. 2002; 12: 133–144. doi: 10.1080/09603120220129292. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    70. Hermansson M., Jones G.W., Kjelleberg S. Частота резистентности к антибиотикам и тяжелым металлам, пигментация и плазмиды у бактерий на границе раздела воздух-вода. заявл. Окружающая среда. микробиол. 1987;53:2338–2342. doi: 10.1128/AEM.53.10.2338-2342.1987. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    71. Schwartz T., Kohnen W., Jansen B., Obst U. Обнаружение устойчивых к антибиотикам бактерий и их генов устойчивости в сточных водах, поверхностных водах, и биопленки питьевой воды. ФЭМС микробиол. Экол. 2003;43:325–335. doi: 10.1111/j.1574-6941.2003.tb01073.x. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    72. Sengeløv G., Agersø Y., Halling-Sørensen B. , Baloda S.B., Andersen J.S., Jensen L.B. Уровни устойчивости бактерий к антибиотикам на сельскохозяйственных угодьях Дании в результате обработки навозной жижей свиней. Окружающая среда. Междунар. 2003; 28: 587–59.5. doi: 10.1016/S0160-4120(02)00084-3. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    73. Sarda-Estève R., Baisnée D., Guinot B., Sodeau J., O’Connor D., Belmonte J., Besancenot J.-P., Petit Дж.-Э., Тибодон М., Оливер Г. и др. Изменчивость и географическое происхождение пятилетних концентраций переносимых по воздуху грибковых спор, измеренных в Сакле, Франция, с 2014 по 2018 год. Remote Sens. 2019; 11:1671. doi: 10.3390/rs11141671. [CrossRef] [Google Scholar]

    74. Миллингтон В.М., Корден М. Долгосрочные тенденции в помещении Спора Aspergillus/Penicillum в Дерби, Великобритания, с 1970 по 2003 год и сравнительное исследование, проведенное в 1994 и 1996 годах с воздухом помещений двух местных домов. Аэробиология. 2005; 21:105–113. doi: 10.1007/s10453-005-4180-1. [CrossRef] [Google Scholar]

    75. Берроуз С.М., Элберт В., Лоуренс М.Г., Пёшль У. Бактерии в глобальной атмосфере – Часть 1: Обзор и обобщение литературных данных по различным экосистемам. Атмос. хим. физ. 2009; 9: 9263–9280. doi: 10.5194/acp-9-9263-2009. [Перекрестная ссылка] [Академия Google]

    76. Тонг Ю., Лайтхарт Б. Годовая концентрация бактериальных частиц и распределение по размерам в окружающей атмосфере в сельской местности долины Уилламетт, штат Орегон. Аэрозольные науки. Технол. 2000; 32: 393–403. doi: 10.1080/027868200303533. [CrossRef] [Google Scholar]

    77. Негрин М.М., Дель Панно М.Т., Ронко А.Е. Изучение биоаэрозолей и влияния местности в районе Ла-Платы (Аргентина) с использованием традиционных методов и методов на основе ДНК (отпечатков пальцев). Аэробиология. 2007; 23: 249–258. doi: 10.1007/s10453-007-9069-8. [CrossRef] [Google Scholar]

    78. Боваллиус А., Бухт Б., Роффи Р., Анас П. Трехлетнее исследование естественной воздушно-капельной бактериальной флоры в четырех местах в Швеции. заявл. Окружающая среда. микробиол. 1978; 35: 847–852. doi: 10.1128/AEM.35.5.847-852.1978. [PMC free article] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    79. Di Giorgio C., Krempff A., Guiraud H., Binder P., Tiret C., Dumenil G. Загрязнение атмосферы переносимыми по воздуху микроорганизмами в город Марсель. Атмос. Окружающая среда. 1996;30:155–160. doi: 10.1016/1352-2310(95)00143-M. [CrossRef] [Google Scholar]

    80. Bowers R.M., Clements N., Emerson J.B., Wiedinmyer C., Hannigan M.P., Fierer N. Сезонная изменчивость бактериального и грибкового разнообразия приповерхностной атмосферы. Окружающая среда. науч. Технол. 2013;47:12097–12106. doi: 10.1021/es402970s. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    81. Li M., Qi J., Zhang H., Huang S., Li L., Gao D. Концентрация и распределение биоаэрозолей по размерам в наружной среде в Циндао прибрежный район. науч. Общая окружающая среда. 2011;409: 3812–3819. doi: 10.1016/j.scitotenv.2011.06.001. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    82. Бертолини В., Гандольфи И., Амброзини Р., Бестетти Г., Инносенте Э., Рампаццо Г., Францетти А. Временная изменчивость и влияние переменных окружающей среды на воздушно-капельный бактериальные сообщества в городской местности Северной Италии. заявл. микробиол. Биотехнолог. 2013;97:6561–6570. doi: 10.1007/s00253-012-4450-0. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    83. Брагошевска Е., Майнка А., Пастушка Ю.С. Концентрация и распределение размеров культивируемых бактерий в окружающем воздухе весной и зимой в Гливицах: типичная городская территория. Атмос. 2017;8:239. doi: 10.3390/atmos8120239. [CrossRef] [Google Scholar]

    84. Стрилюк М.Л., Ахо К., Вебер К.Ф. Влияние времени года и наземного биома на обилие бактерий с признаками, способствующими росту растений, в нижних слоях атмосферы. Аэробиология. 2017; 33:137–149. doi: 10.1007/s10453-016-9456-0. [CrossRef] [Google Scholar]

    85. Танака Д., Терада Ю., Накашима Т., Сакатоку А., Накамура С. Сезонные изменения в структурах переносимых по воздуху бактериальных сообществ в пригороде центральной Японии за год. период с использованием метода PCR-DGGE. Аэробиология. 2015; 31: 143–157. doi: 10.1007/s10453-014-9353-3. [CrossRef] [Google Scholar]

    86. Равва С.В., Хернлем Б.Дж., Сарреал К.З., Мандрелл Р.Е. Бактериальные сообщества в городских аэрозолях, собранные циклоническими пробоотборниками со смоченными стенками, и сезонные колебания живых и культивируемых аэрозольных бактерий. Дж. Окружающая среда. Монит. 2012; 14: 473–481. doi: 10.1039/C1EM10753D. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    87. Агарвал С., Мандал П., Маджумдар Д., Аггарвал С.Г., Шривастава А. Характеристика биоаэрозолей и их взаимосвязь с OC, EC и карбонильными ЛОС в оживленных придорожных ресторанах -Кластер в Нью-Дели. Аэрозоль Эйр Квал. Рез. 2016;16:3198–3211. doi: 10.4209/aaqr.2016.01.0043. [CrossRef] [Google Scholar]

    88. Раджпут П., Анджум М.Х., Гупта Т. Годовой отчет о концентрации биоаэрозолей и частиц на Индо-Гангской равнине: влияние выбросов сжигания биомассы на высокий уровень воздействия эндотоксинов. Окружающая среда. Загрязн. 2017; 224:98–106. doi: 10.1016/j.envpol.2017.01.045. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    89. Агарвал С. Сезонная изменчивость бактериальных частиц с разделением по размеру в воздухе и их характеристика в разных местах происхождения. Окружающая среда. науч. Загрязн. Рез. 2017;24:13519–13527. doi: 10.1007/s11356-017-8705-2. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    90. Парк Дж., Ичидзё Т., Насу М., Ямагути Н. Исследование бактериального воздействия пыльных явлений в Азии путем сравнения с сезонной изменчивостью атмосферного бактериального сообщества на открытом воздухе. науч. Отчет 2016a; 6: 35706: 1–35706: 8. doi: 10.1038/srep35706. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    91. Kallawicha K., Lung S.-C.C., Chuang Y.-C., Wu C.-D., Chen T.-H., Цай Ю.-Дж., Чао Х.Дж. Пространственно-временное распределение и модели регрессии землепользования окружающих бактерий и эндотоксинов в районе Большого Тайбэя. Аэрозоль Эйр Квал. Рез. 2015;15:1448–1459. doi: 10.4209/aaqr.2015.01.0036. [CrossRef] [Google Scholar]

    92. Barrett T.C., Mok W.W.K., Murawski A.M., Brynildsen M.P. Повышенное развитие устойчивости к антибиотикам у персистирующих фторхинолонов после однократного воздействия антибиотика. Нац. коммун. 2019;10:117:1–117:11. doi: 10.1038/s41467-019-09058-4. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    93. Knapp C.W., Dolfing J., Ehlert P.A., Graham D.W. Доказательства увеличения содержания генов устойчивости к антибиотикам в заархивированных почвах с 19 г.40. Окружающая среда. науч. Технол. 2009; 44: 580–587. doi: 10.1021/es

    1x. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    94. Tiedje J.M., Wang F., Manaia C.M., Virta M., Sheng HJ, Ma LP, Zhang T., Topp E. Гены устойчивости к антибиотикам в условиях воздействия человека : Перспектива One Health. Педосфера. 2019;29:273–282. doi: 10.1016/S1002-0160(18)60062-1. [CrossRef] [Google Scholar]

    95. Xu R., Yang Z.-H., Zheng Y., Wang Q. -P., Bai Y., Liu J.-B., Zhang Y.-R. , Сюн В.-П., Лу Ю., Фань Ц.-З. Метагеномный анализ выявляет влияние длительного воздействия антибиотиков на анаэробное переваривание ила и риск устойчивости к противомикробным препаратам. Биоресурсная технология. 2019;282:179–188. doi: 10.1016/j.biortech.2019.02.120. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    96. Улла Р., Ясир М., Биби Ф., Абуджамель Т.С., Хашем А.М., Сартадж Сохраб С., Аль-Ансари А., Аль-Софьяни А.А., Аль- Гамди А.К., Аль-Сиени А. и др. Таксономическое разнообразие устойчивых к противомикробным препаратам бактерий и генов на побережье Красного моря. науч. Общая окружающая среда. 2019; 677: 474–483. doi: 10.1016/j.scitotenv.2019.04.283. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    97. Houndt T., Ochman H. Долгосрочные сдвиги в моделях устойчивости кишечных бактерий к антибиотикам. заявл. Окружающая среда. микробиол. 2000; 66: 5406–5409.. doi: 10.1128/AEM.66.12.5406-5409.2000. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    98. Moellering R.C., Jr., Graybill J.R., McGowan J.E., Corey L. Инициатива по предотвращению устойчивости к противомикробным препаратам — обновление: Proceedings of the Expert Panel on Resistance. Являюсь. Дж. Мед. 2007; 120:S4–S25. doi: 10.1016/j.amjmed.2007.04.001. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    99. Zhang M., Zuo J., Yu X., Shi X., Chen L., Li Z. Количественная оценка мультиантибиотикорезистентных условно-патогенных бактерий в биоаэрозолях в вокруг фармацевтической станции очистки сточных вод. Дж. Окружающая среда. науч. 2018;72:53–63. doi: 10.1016/j.jes.2017.12.011. [PubMed] [CrossRef] [Академия Google]

    100. Коул М.Л., Сингх О.В. Возникновение микробов и устойчивость к антибиотикам в готовых к употреблению пищевых продуктах. Дж. Пищевая наука. Технол. 2018;55:2600–2609. doi: 10.1007/s13197-018-3180-4. [PMC free article] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    101. Мишра М., Аруха А.П., Патель А.К., Бехера Н., Моханта Т.К., Ядав Д. Мультирезистентная кишечная палочка: водные санитарные стандарты и здоровье Опасности. Фронтирс Фармакол. 2018;9:311:1–311:8. doi: 10.3389/fphar.2018.00311. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    102. Сингх С.К., Экка Р., Мишра М., Мохапатра Х. Ассоциативное исследование множественной устойчивости к антибиотикам и вирулентности: стратегия оценки степени риска, представляемого бактериальной популяцией в водной среде. Окружающая среда. Монит. Оценивать. 2017;189:320:1–320:12. doi: 10.1007/s10661-017-6005-4. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    103. Сафатов А.С., Андреева И.С., Буряк Г.А., Вечканов В.А., Воробьева И.Г., Олькин С.Е., Резникова И.К., Соловьянова Н.А., Теплякова Т.В., Аршинов М.Ю., и др. Результаты многолетнего мониторинга биогенных компонентов атмосферных аэрозолей на высотах 500–7000 м на юге Западной Сибири; Материалы реферативной Европейской конференции по аэрозолям 2016 г .; Тур, Франция. 4–9сентябрь 2016 г.; п. О2-ААС-ААП-08. [Google Scholar]

    104. Blais Lecours P., Duchaine C., Thibaudon M., Marsolais D. Воздействие биоаэрозоля на здоровье. В: Делорт А.-М., Амато П., редакторы. Микробиология аэрозолей. Опубликовано Wiley-Blackwell; Хобокен, Нью-Джерси, США: 2018. стр. 251–268. Глава 4.1. [Google Scholar]

    Europe PMC

    Основные редакции:

    • Похоже, что сродство связывания (Kd) между хеймонином и D-(+)-галактуроновой кислотой выше, чем у ЛПС в анализе ITC, но обратное в анализ SPR, авторы должны объяснить причину.

    Спасибо за ваши любезные предложения. ITC и SPR представляют собой разные методы исследования реакции связывания. ITC представляет собой биофизический метод, непосредственно характеризующий тепловое изменение связывающих взаимодействий в растворе. Тем не менее, SPR является мощным инструментом мониторинга динамического процесса связывания и деградации реакции между твердой и жидкой фазами (Du X, et al., 2016). Поэтому взаимодействие между твердой и жидкой фазами неизбежно отличается от взаимодействия между двумя жидкими фазами. Таким образом, это нормально иметь разные значения аффинности связывания, измеренные двумя экспериментальными методами, о чем также сообщили некоторые исследователи (Yujia He 2021, Chen, et al. , 2014). Например, Yujia He et al. сообщили, что значения Kd миозина и гексанала/октаналя, обнаруженные с помощью SPR, составляли 5,9.± 3,9 М × 10 90 225 -5 90 226 . Однако они, полученные ITC, составили 55,9 ± 15,1 М × 10 90 225 -5 90 226 и 26,0 ± 1,0 М × 10 90 225 -5 90 226 соответственно. Таким образом, мы считаем закономерным расхождение констант диссоциации двух разных анализов.

    • Структурные данные не тесно связаны с его функцией, связанной с сепсисом. Первичный структурный анализ показал, что хейнонин содержит 12 основных остатков. Вторичный структурный анализ показал, что хейнонин в основном принимает α-спиральную конформацию. Отвечают ли эти структурные характеристики за его деятельность? В текущей работе отсутствует исследование взаимосвязи структура-активность.

    Мы очень признательны за ваши ценные и содержательные комментарии о нашей рукописи. Сепсис — смертельное заболевание, характеризующееся полиорганной недостаточностью. Липополисахарид (ЛПС) играет решающую роль при сепсисе и септическом шоке за счет гиперактивации врожденной иммунной системы. Heymonin (cath-MH) в первую очередь принял амфипатическую α-спиральную структуру в средах, имитирующих мембраны, и в растворах LPS, что является общей структурной характеристикой большинства кателицидинов бесхвостых амфибий (Agier et al., 2015). В отличие от дефенсинов, кателицидиновое семейство АМП, особенно те из них, которые имеют спиральную структуру в липидах, обладают антимикробной активностью и активностью по нейтрализации ЛПС (Durr et al., 2006; Gennaro et al., 2000; Hirata et al., 19).94). Выравнивание последовательностей продемонстрировало 50%-ное сходство последовательностей Heymonin (cath-MH) и LL-37 человека. Однако человеческий LL-37 обладает многофункциональностью. Хеймонин (cath-MH) содержал в своей пространственной структуре больше петель, чем LL-37. Обычно предполагается, что структура цикла играет большую роль в поддержании дополнительных функций. Например, SMAP-29 содержит несколько сайтов связывания и центральный шарнир, которые совместно связывают LPS с высокой аффинностью (B. F. et al.2002).

    • Согласно описанию авторов, тяжелый сепсис связан с аномальной коагуляцией, и кажется, что Heymonin может обратить этот аномальный процесс in vivo во время лечения септических мышей. Однако доказательств недостаточно, хотя авторы продемонстрировали, что хеймонин может дозозависимо ингибировать свертывание плазмы in vitro. Если они смогут доказать его антикоагулянтный эффект с помощью эксперимента с кровотечением из хвоста в естественных условиях, это будет прекрасно.

    Спасибо за содержательное предложение. Мы добавили этот эксперимент в исправленную версию. Как показано на Рисунке 8 (дополнение 1 к рисунку), время кровотечения у мышей с сепсисом, индуцированным CLP, значительно уменьшилось по сравнению с контрольной группой, и группа лечения хеймонином (cath-MH) смогла обратить это изменение вспять.

    • Автор должен указать уникальное различие между хеймонином и другим кателицидином посредством анализа данных или фонового поиска.

    Спасибо за ваши любезные предложения. Как показано в следующей таблице, было показано, что кателицидины убивают микробы, нейтрализуют LPS и модулируют активацию нескольких лигандов толл-подобных рецепторов (TLR). В отличие от любых других известных кателицидинов лягушек, как показано на рисунке 1C, больше остатков в хеймонине (cath-MH) удлиняются после С-конца дисульфидного мостика, а последовательность KVKQ находится в интервале между консервативными остатками K10 и KIK16. . Кроме того, по сравнению с кателицидином-PY (Wei et al., 2013) и кателицидином-RC1 (Ling et al., 2014), Heymonin (cath-MH) содержит более крупную спираль и дополнительные водородные связи. Однако, по сравнению с LL-37, Heymonin (cath-MH) имеет дополнительную петлю на С-конце (Dürr et al., 2006). Предсказанные структуры Hc-CATH (Wei et al., 2015) и кателицидин-RC2 (Ling et al., 2014) демонстрируют конформацию спираль-цепь-спираль. Кроме того, кателицидин-PP в основном принимает структуру β-листа с небольшой α-спиралью (Mu et al. , 2017). Все они также отличаются от Heymonin (cath-MH). Из-за различий в пространственной структуре с другими кателицидинами хеймонин (cath-MH) обладает дополнительными функциями по сравнению с другими известными кателицидинами, такими как ингибирующая активность сериновых протеаз.

    Таблица ответов авторов 1.

    Структура и функция различных кателицидинов.

    37 противомикробная активность; нейтрализация ЛПС; противовоспалительное средство; заживление ран и ангиогенез; терапевтическая эффективность сепсиса; индукция активации тромбоцитов
    Пептид Происхождение Последовательность аминокислот #AA Функция Ref. антимикробная активность; нейтрализация LPS
    ; терапевтическая эффективность сепсиса; Ингибирующая активность сериновых протеаз 9противомикробная активность; нейтрализация ЛПС; противовоспалительное
    (Wei et al., 2013)
    человек LL-37 человек LLGDFFRKSKEKIGKEFKRIVQRIKDFLRNLVPRTES
    (Durr et al. , 2006). нейтрализация ЛПС; противовоспалительное (Wei et al., 2005)
    курица CATH-2 курица RFGRFLRKIRRFRPKVTITIQGSARG 26 антимикробная активность; иммуномодулирующие (Kraaij et al., 2020)
    кателицидин-PP древесная лягушка Polypedates puerensis ASENGKCNLLCLVKKKLRAVGNVIKTVVGKIA 32 противомикробная активность;
    ЛПС нейтрализация; anti-inflammatory
    (Mu L et al., 2017)
    cathelicidin-RC1 Bullfrog Rana
    Catesbeiana
    KKCKFFCKVKKKIKSIGFQIPIVSIPFK 28 antimicrobial activity (Ling et al. , 2014)
    Кателицидин-RC2 Bullfrog Rana
    Catesbeiana
    KKCGFFCKLKNKLKSTGSRSNIAAGTHGGTFRV 33 weak antimicrobial activity (Ling et al., 2014)

    • The authors said that the putative cleavage site of the mature heynonin was based on известные кателицидины лягушки, и предполагаемый сайт расщепления зрелого хейнонина находился между Gly и Ala. Но сайты расщепления многих известных кателицидинов лягушки не находились между Gly и Ala. И авторы должны представить фон сайтов расщепления известных кателицидинов лягушки. во вводном разделе.

    Спасибо за ваши любезные предложения. Протеолитическое созревание необходимо для того, чтобы кателицидин проявил свою противомикробную активность (Cole et al. , 2001). Для последовательностей млекопитающих это расщепление обычно происходит за счет действия эластазы на валин, или аланин, или изолейцин. Однако существуют и др. сайты, чувствительные к эластазе (Shinnar et al., 2003). У амфибий большинство зрелых биоактивных пептидов образуются из предшественника путем расщепления по классическому сайту расщепления -KR-, расположенному проксимальнее N-конца. Но неполные пептиды отщепляются от своих предшественников по сайтам расщепления -RR- или -KK-. По сравнению с другими кателицидинами большинство зрелых пептидов высвобождаются после четырех остатков, следующих за сайтом расщепления -KR- (Xu and Lai, 2015). Кроме того, анализ физико-химических параметров показал, что зрелый пептид хеймонина (cath-MH) заряжен более положительно, чем последовательность с дополнительными четырьмя остатками после сайта расщепления -KR-. Обладая высокой катионностью, АМП могут проявлять начальные электростатические взаимодействия с отрицательно заряженными компонентами бактериальной мембраны (Takahashi et al. , 2010). Основываясь на этом анализе, мы предсказали последовательность зрелого пептида APCKLGCKIKKVKQKIKQKLKAKVNAVKTVIGKISEHLG, что подтверждается анализом функции синтезированного пептида.

    • Антимикробная активность хейнонина (дополнительный файл 1D) и кинетика уничтожения бактерий хейнонина (дополнительный файл 1E) являются важными результатами исследования, и я предлагаю авторам перенести эти результаты на рисунок 4.

    Спасибо за ваше предложение, и мы переместили эти таблицы в качестве дополнения к рисунку 4 и переименовали его в рисунок 3 — дополнение к рисунку 1.

    • Как анализ кругового дихроизма хейнонина, так и анализ кристаллической структуры хейнонина являются вторичным структурным анализом. Поэтому я думаю, что рисунок 2 и рисунок 3 нужно объединить в один рисунок.

    Спасибо за ваше любезное предложение, и мы объединили рис. 2 и рис. 3 в исправленной рукописи.

    • Авторы отметили, что хеймонин проявлял различную активность в отношении разных ферментов. Например, он увеличивал ферментативную активность химазы, но значительно ингибировал ферментативную активность tPA, плазмина, β-триптазы, эластазы и тромбина. Как известно, эти ферменты относятся к сериновым протеиназам. Редко когда небольшой пептид оказывает такое разное действие на сериновые протеазы, авторы должны объяснить причину? Кроме того, на основании того факта, что хеймонин может ингибировать коагуляцию плазмы in vitro, авторы полагают, что хеймонин может ингибировать аномальную коагуляцию у септических мышей, что способствует их антисептической обработке. Тем не менее, доказательств недостаточно, и следует добавить его антикоагулянтный эффект in vivo. Наконец, эти ферменты являются критически важными сериновыми протеазами, которые могут влиять на наши физиологические и патологические состояния. Поэтому побочные эффекты (токсичность) хейнонина необходимо оценить на мышах.

    1. Спасибо за ваши любезные предложения. В отличие от любых других известных кателицидинов лягушек, в хеймонине (cath-MH) больше остатков вытянуто на С-конце дисульфидного мостика, а последовательность KVKQ находится в интервале между консервативными остатками K10 и KIK16. Кроме того, по сравнению с кателицидином-PY (Wei et al., 2013), Heymonin (cath-MH) содержит более крупную спираль и пять дополнительных водородных связей. Таким образом, Heymonin (cath-MH) может иметь дополнительные функции по сравнению с другими известными кателицидинами амфибий. Heymonin (cath-MH) функционирует in vivo как ингибитор образования сериновых протеаз. Также известно, что человеческий LL-37 ингибирует физиологические процессы, одновременно атакуя более одного пути активации (Su et al., 2016), что связано с серией протеаз. В отличие от LL-37, хеймонин (cath-MH) содержит дополнительную петлю на С-конце. Обычно предполагается, что структура цикла играет большую роль в поддержании дополнительных функций. Таким образом, пептид может проявлять различную активность в отношении ферментов. Конечно, мы также не можем исключить возможность того, что Heymonin (cath-MH) может нацеливаться на конкретное место другим способом.

    Стыковка белка между Heymonin (cath-MH) и химазой или тромбином была выполнена сервером ZDOCK и проанализирована с помощью программного обеспечения PyMOL. Результаты показали, что Heymonin (cath-MH) может связывать как химазу, так и тромбин посредством водородных связей (рис. 1A). ). Однако хеймонин (cath-MH) может связываться с поверхностью химазы, которая отличается от других ингибиторов химазы, таких как ингибитор трипсина-1 подсолнечника (Li, et al., 2020). Однако Heymonin (cath-MH) находится в тесном контакте с множественными остатками в экзосайте-I (одна из заметных расщелин активного сайта тромбина), как показано на рисунке 1B (Koh, et al., 2011). Для комплекса хеймонина (cath-MH) и тромбина остатки Lys13, Lys19, Val30 и Ile34 хеймонина (cath-MH) могут образовывать пять водородных связей с Asp60, Gln151, Arg75 и Arg78 тромбина. Кроме того, остатки Lys23 хеймонина (cath-MH) могут образовывать четыре водородные связи (Arg73, Trp141, Glu192 и Asn143) с остатками тромбина. Хеймонин (cath-MH) связывается с поверхностями активного центра тромбина, которые взаимодействуют с остатками субстрата, поскольку пептид ингибирующего сайта уже занял внешний сайт, который ингибирует свертывание крови.

    Сравнение моделей хеймонина (cath-MH), связанного с химазой (A) и тромбином (B).

    Моделирование молекулярной динамики было выполнено для изучения связывающих взаимодействий хеймонина (cath-MH) с использованием моделей, созданных на основе существующих рентгеновских кристаллических структур химазы (PDB ID 4AG1) и тромбина (PDB ID 4UD9). Модель хеймонина (cath-MH) (голубой или синий), связанного с химазой (A. серый) или тромбином (B. серый), показана слева, фермент показан в виде ленты, а хеймонин (cath-MH) показан в модели стика (цвет CPK, голубой или синий) справа.

    2. Спасибо за ваше содержательное предложение, и мы добавили соответствующие анализы в исправленную рукопись. (Рисунок 8—дополнение к рисунку 1).

    3. Гемолиз и токсичность Хеймонина (кат-МХ).

    Результаты показали, что Heymonin (cath-MH) не оказывает гемолизирующего действия на эритроциты мышей, а скорость его гемолиза составляет 2,64 ± 1,40 при концентрации 212,77 мкг/мл. Для оценки острой токсичности хеймонина (cath-MH) для мышей были проведены биохимические анализы крови нормальных мышей, инокулированных PBS или хеймонином (cath-MH), и исследованы гистопатологические изменения тканей мышей. Как показано на Рисунке 8 — дополнение к рисунку 2B-E, не было никаких существенных различий в уровнях АСТ, АЛТ, АМК и Cr в сыворотке между двумя группами после 24-часовой и 48-часовой инокуляции. Кроме того, не наблюдалось значительных гистопатологических изменений в тканях легких, печени и почек между контрольными мышами и мышами, получавшими хеймонин (cath-MH) (рис. 8 — дополнение к рисунку 2F). Все мыши выжили и выглядели здоровыми без какого-либо аномального поведения и очевидных различий в прибавке массы тела между двумя группами в течение 7-дневного периода наблюдения (данные не представлены). Следовательно, инъецированная доза геймонина (cath-MH), 10 мг/кг, не вызывала острой токсичности у мышей или вызывала небольшую острую токсичность, не было значительных гистопатологических изменений в тканях между контрольной группой и мышами, получавшими Heymonin (cath-MH).

    • Чтобы выяснить, является ли реакция связывания хеймонина с ЛПС и D-(+)-галактуроновой кислотой специфичной, в тесты бактериальной агглютинации, анализ ITC и анализ SPRi следует ввести изотипический пептид (скремблированный хеймонин).

    Мы очень признательны за ваши ценные и содержательные комментарии о нашей рукописи. Более одного вида пептидов были нанесены на поверхность золотых чипов в анализе SPRi, и результаты показали, что другой пептид не вызывал интенсивного изменения сигнала SPRi (данные не показаны), что указывает на то, что эти пептиды не могут связываться с тестируемыми протеазами. Мы пробовали другие пептиды связывать LPS и D-(+)-галактуроновую кислоту в анализе ITC, и они не связывались. Кроме того, в тестах бактериальной агглютинации мы также использовали БСА в качестве отрицательного контроля.

    Ссылки:

    1) Du X, Li Y, Xia YL, Ai SM, Liang J, Sang P, Ji XL, Liu SQ. 2016. Взгляд на взаимодействие белок-лиганд: механизмы, модели и методы. Международный журнал молекулярных наук 17:144, DOI:10.3390/ijms17020144, PMID: 26821017

    2) Юцзя Хе, Чаньюй Чжоу, Чунбао Ли, Гуанхун Чжоу. 2021. Влияние температуры инкубации на способность связывания вкусоароматических соединений с миозином. Пищевая химия 346: 128976, DOI: 10.1016/j.foodchem.2020.128976, PMID: 33476948

    3) Чен К., Михельсен К., Курзея Р.Дж., Хан Дж., Вазир М., Ст. Дж.Д.Дж., Хейл С., Вал Р.С. 2014. Открытие низкомолекулярных регуляторных белковых модуляторов глюкокиназы, восстанавливающих активность глюкокиназы. Журнал биомолекулярного скрининга. 19:1014-23, DOI: 10.1177/1087057114530468, PMID: 24717911

    4) Agier J, Efenberger M, Brzezinska-Blaszczyk E. 2015. Влияние кателицидина на воспалительные клетки. Центрально-европейский журнал иммунологии 40:225-35, DOI: 10.5114/ceji.2015.51359, PMID: 26557038

    5) Durr, U.H.; Судхеендра, США; Ramamoorthy, A. 2006. LL-37, единственный человеческий представитель кателицидинового семейства противомикробных пептидов. Биохим Биофиз Акта 1758: 1408-1425. DOI: 10.1016/j.bbamem.2006.03.030, PMID: 16716248

    6) Дженнаро Р.; Zanetti, M. 2000. Структурные особенности и биологическая активность противомикробных пептидов, производных кателицидина. Биополимеры 55:31-49. DOI: 10.1002/1097-0282(2000)55:1<31::AID-BIP40>3.0.CO;2-9, PMID: 10931440

    7) Хирата М.; Шимомура, Ю.; Йошида, М .; Райт, Южная Каролина; Ларрик, Дж.В. 1994. Эндотоксин-связывающие синтетические пептиды с эндотоксин-нейтрализующей, антибактериальной и антикоагулянтной активностью. прог. клин. биол. Рез. 388, 147-159. PMID: 7831355

    8) Б.Ф. Тэк, М.В. Савай, У.Р. Кирни, А.Д. Робертсон, М.А. Шерман, У. Ван, Т. Хонг, Л.М. Бу, Х. Ву, А.Дж. Waring, RI Lehrer 2002. SMAP29 имеет два сайта связывания LPS и центральный шарнир. Европейский журнал биохимии 269:1181-1189. DOI: 10.1046/j.0014-2956.2002.02751.x, PMID: 11856344

    9) Mu L, Zhou L, Yang J, Zhuang L, Tang J, Liu T, Wu J, Yang H. 2017. Первый идентифицированный кателицидин из древесных лягушек обладает противовоспалительным действием. и мероприятия по частичной нейтрализации ЛПС. АМИНОКИСЛОТЫ 49:1571-1585. DOI: 10.1007/s00726-017-2449-7, PMID: 28593346

    10) Wei L, Yang J, He X, Mo G, Hong J, Yan X, Lin D, Lai R. 2013. Structure and function a a мощный липополисахарид-связывающий противомикробный и противовоспалительный пептид. Журнал медицинской биохимии 56:3546-3556. DOI: 10.1021/jm4004158, PMID: 23594231

    11) Дурр, У.Х.; Судхеендра, США; Ramamoorthy, A. 2006. LL-37, единственный человеческий представитель кателицидинового семейства противомикробных пептидов. Биохим Биофиз Акта 1758: 1408-1425. DOI: 10.1016/j.bbamem.2006.03.030, PMID: 16716248

    12) Wei L, Gao J, Zhang S, Wu S, Xie Z, Ling G, Kuang YQ, Yang Y, Yu H, Wang Y. 2015 , Идентификация и характеристика первого кателицидина из морских змей с мощной антимикробной и противовоспалительной активностью и специальным механизмом. Журнал биологической химии 290:16633-16652. DOI: 10.1074/jbc.M115.642645, PMID: 26013823

    13) Kraaij MD, van Dijk A, Scheenstra MR, van Harten RM, Haagsman HP, Veldhuizen E. 2020. Куриный CATH-2 увеличивает маркеры презентации антигена на куриных моноцитах и макрофаги. Письма о белках и пептидах 27: 60-66. DOI: 10.2174/0929866526666190730125525, PMID: 31362652

    14) Ling G, Gao J, Zhang S, Xie Z, Wei L, Yu H, Wang Y. 2014. Кателицидины из лягушки-быка Rana catesbeiana обеспечивают новый шаблон для дизайна пептидных антибиотиков. ПЛОС ОДИН 9:e93216. DOI: 10.1371/journal.pone.0093216, PMID: 24675879

    15) Cole AM, Shi J, Ceccarelli A, Kim YH, Park A, Ganz T. 2001. раны. Кровь 97:297-304. DOI:10.1182/blood.v97.1.297, PMID: 11133774

    16) Шиннар, А.Е., Батлер, К.Л., Парк, Х.Дж., 2003. Семейство кателицидинов противомикробных пептидов: протеолитический процессинг и устойчивость к протеазам. Биоорганическая химия 31: 425e436. DOI: 10.1016/S0045-2068(03)00080-4, PMID: 14613764

    17) Xu X, Lai R. 2015. Химия и биологическая активность пептидов кожных выделений амфибий. Химические обзоры 115:1760-1846. DOI:10.1021/cr4006704, PMID: 25594509

    18) Takahashi D, Shukla SK, Prakash O, Zhang G. 2010. Структурные детерминанты защитных пептидов хозяина для антимикробной активности и селективности клеток-мишеней. БИОХИМИЯ 92:1236-1241. DOI:10.1016/j.biochi.2010.02.023, PMID: 20188791

    19) Wei L, Yang J, He X, Mo G, Hong J, Yan X, Lin D, Lai R. 2013. Structure and function a a мощный липополисахарид-связывающий противомикробный и противовоспалительный пептид. Журнал медицинской биохимии 56:3546-3556. DOI: 10.1021/jm4004158, PMID: 23594231

    20) Su W, Chen Y, Wang C, Ding X, Rwibasira G, Kong Y. 2016. Человеческий кателицидин LL-37 ингибирует агрегацию тромбоцитов и тромбоз посредством передачи сигналов Src/PI3K/Akt. Сообщения о биохимических и биофизических исследованиях 473: 283-289. DOI: 10.1016/j.bbrc.2016.03.095, PMID: 27012197

    21) Li CY, Yap K, Swedberg JE, Craik DJ, de Veer SJ. 2020. Замены связывающей петли в циклическом пептиде SFTI-1 генерируют мощные и селективные ингибиторы химазы. Журнал медицинской биохимии 63:816-826. DOI: 10.1021/acs.jmedchem.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *